液相色谱定量分析原理

液相色谱定量分析原理

液相色谱定量分析原理

在定性的基础上定量,需有纯物质作为标准物

液相色谱定量是相对定量的方法:即由已知量的纯标样推算混合物中被测物的量

定量的依据是:

• 被测组分的量与响应值(峰高或峰面积)成正比

• 由已知量的标样可求得定量校正因子

• 定量校正因子:是定量计算公式中的比例常数,其物理意义是单位响应值(峰面积)所代表的被测组分的量

• 测定未知组分的响应值,通过定量校正因子即可求得其含量

液相色谱定量分析的步骤

1、选择一个适合定量分析的色谱方法：

• 确认被检测组分峰,并达到分离度(R)大于1.5

• 确定被测组分色谱峰的一致性(纯度)

• 确定方法的检测限及定量限;灵敏度及线性范围

2、用不同浓度的标准样品建立校正曲线

3、考查定量方法的准确度及精密度

4、用相应的色谱管理软件实施样品采集,数据处理及报告结果

确认定量峰的一致性

确认色谱峰的一致性(纯度)

• 保证每个色谱峰下只有一个被测的组份

• 检查是否有共流出的物质（杂质）干扰

色谱峰一致性(纯度)确认的方法

• 用光电二极管矩阵(PDA)检测器比较光谱图

• 峰纯度鉴定

• 2996的纯度角理论

常用的定量方法

标准曲线法,分为外标法和内标法:

外标法：在液相色谱中用得*多

内标法：准确，但是麻烦，在标准方法中用得*多