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液相色谱定量分析原理

点击次数:476  发布时间:2020-11-28

液相色谱定量分析原理

液相色谱定量分析原理

在定性的基础上定量,需有纯物质作为标准物

液相色谱定量是相对定量的方法:即由已知量的纯标样推算混合物中被测物的量

定量的依据是:

  • 被测组分的量与响应值(峰高或峰面积)成正比

  • 由已知量的标样可求得定量校正因子

  • 定量校正因子:是定量计算公式中的比例常数,其物理意义是单位响应值(峰面积)所代表的被测组分的量

  • 测定未知组分的响应值,通过定量校正因子即可求得其含量

 

液相色谱定量分析的步骤

1、选择一个适合定量分析的色谱方法:

  • 确认被检测组分峰,并达到分离度(R)大于1.5

  • 确定被测组分色谱峰的一致性(纯度)

  • 确定方法的检测限及定量限;灵敏度及线性范围

2、用不同浓度的标准样品建立校正曲线

3、考查定量方法的准确度及精密度

4、用相应的色谱管理软件实施样品采集,数据处理及报告结果

确认定量峰的一致性

确认色谱峰的一致性(纯度)

  • 保证每个色谱峰下只有一个被测的组份

  • 检查是否有共流出的物质(杂质)干扰

色谱峰一致性(纯度)确认的方法

  • 用光电二极管矩阵(PDA)检测器比较光谱图

  • 峰纯度鉴定

  • 2996的纯度角理论

常用的定量方法

标准曲线法,分为外标法和内标法:

外标法:在液相色谱中用得*多

内标法:准确,但是麻烦,在标准方法中用得*多

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